Тест для определения вич

Основные виды диагностики ВИЧ-инфекции

Вирусологическая диагностика основана на выявлении ВИЧ в тканях и биологических жидкостях больного.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) применяется с целью выявления вируса и оценки вирусной нагрузки, что позволяет судить об эффективности специфического лечения и прогнозировать течение инфекционного заболевания.

Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к вирусу иммунодефицита человека с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга.

Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4 : CD8.

Каждый из лабораторных методов диагностики ВИЧ-инфекции характеризуется определенной чувствительностью (% верно определенных среди заведомо ( ) образцов) и специфичностью (% правильно определенных тестов среди заведомо отрицательных образцов). Результаты теста на ВИЧ интерпретируются как отрицательные, положительные или сомнительные.

Рис. 1. На фото слева ВИЧ заражают иммунную клетку (обозначено желтым). На фото справа лимфоцит, поражённый ВИЧ. Вытянутые структуры на поверхности клетки вызваны гиперпродукцией белка.

Рис. 2. На фото зафиксирован процесс выхода (отпочкования) вирионов из инфицированной клетки.

Очень плохая статистика

Тест для определения вич

Всего за год в России зафиксировано 104 тысячи новых заражений (министерство здравоохранения в лице Вероники Скворцовой выступило с опровержением этих данных, в их реестре за этот год 88 тысяч новых заболевших, что, скорее всего, говорит о том, что не все спешат встать на учет).

В основном вирус передавался при гетеросексуальном половом контакте (59%) и употреблении инъекционных наркотиков (30%). Статистика 2017 года говорила, что 51% заражается при гетеросексуальном половом контакте, то есть эпидемия ширится благодаря половому пути передачи инфекции. А это значит…

Ложноположительный анализ на ВИЧ и другие виды результатов исследования

Анализ крови на ВИЧ может сделать любой житель нашей страны по своему желанию анонимно и бесплатно. Но есть категории лиц, которые обследуется на ВИЧ в обязательном порядке. К ним относятся:

  • все доноры крови и ее компонентов, а также тканей и других биологических жидкостей;
  • лица, которым была проведена трансфузия или осуществлена трансплантация (проводится в течение первых 3-х месяцев после проведения процедуры);
  • беременные;
  • лица, пострадавшие в результате аварии;
  • лица, имеющие клинические показания — лихорадку, диарею, постоянный кашель и увеличение более 2-х групп лимфатических узлов, длящиеся более 1-го месяца, необъяснимую потерю веса, СПИД-ассоциированные и оппортунистические инфекционные заболевания, соматическая и онкопатология;
  • иностранные граждане;
  • лица из группы риска (наркоманы и страдающие венерическими заболеваниями).

Рис. 3. Анализ крови на ВИЧ в нашей стране можно сдать анонимно и бесплатно.

Анализ на ВИЧ можно сдать бесплатно в учреждениях здравоохранения, работающих на бюджетной основе при наличии паспорта и медицинской страховки. Врачи при этом обязаны хранить врачебную тайну. Бесплатно и анонимно можно сдать анализ в Центрах профилактики и борьбы со СПИДом и там же получить врачебную консультацию до и после обследования.

В лаборатории будет сделан анализ крови на ВИЧ иммуноферментным методом (ИФА).

В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.

Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.

Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.

Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:

  1. Доноры крови и другого биологического материала.
  2. При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
  3. Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
  4. При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.

Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.

В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках — платное:

  • Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
  • Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 — 7 дней.
  • Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 — 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 — 14 дней.

В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:

  • При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
  • При применении ИФА 4-го поколения — 6 недель.
  • При применении ПЦР — 4 недели.
  • Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 — 4 недели от предполагаемого заражения.
  • Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.

Из жидкости можно употреблять только обычную воду.

  • Для анализа осуществляется забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
  • До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
  • Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре 4 — 8оС.

Рис. 6. Для анализа на ВИЧ необходимо провести забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены — для чего используется обычный шприц (фото слева) или игла с помпой (фото справа).

Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.

Сомнительный результат тестана ВИЧ получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 — 3 месяца в течение полугода.

Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.

Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.

Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда его причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание, аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.

Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы.

Рис. 7. Проведение серологического исследования крови.

В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.

Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.

Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.

Почти все в группе риска

Русский вопрос: что делать?

Действительно, что делать? Идея о всеобщем сохранении девственности до брака (и строгой верности – в браке) хороша, но нежизнеспособна в силу несовершенства человеческой природы. Альтернативой в наших условиях может стать 100% охват всех заболевших (а не только тех, у кого число лимфоцитов CD4 падает до критической отметки в 500 ед/мкл) антиретровирусной терапий.

Именно так рекомендую сейчас лечить ВИЧ-инфицированных. Ведь источник заражения – не все инфицированные, а только те, у кого высокая вирусная нагрузка. Многоцентровые международные клинические исследования PARTNER2, проводившиеся на протяжении чертырех лет, показали, что в парах, где один партнер ВИЧ-позитивен (с числом вирусных копии 200 и менее в 1 мкл крови), а второй здоров, случаев передачи вируса не отмечено.

Тест-системы, определяющие наличие антител к ВИЧ

При помощи тестирования на антитела к вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.

Антитела к ВИЧ

Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител — специфических иммуноглобулинов. С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител).

Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 — 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц.

У 90 — 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 — 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 — 1% — в более поздние сроки. В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.

С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты, является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом — иммунного блота.

В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Исследование проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ — р24 и gр160.

Тест видит как антитела, которые вырабатываются организмом больного, так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты. Однако более надежными, как считают специалисты здравоохранения РФ, являются сроки 6, 8 или 12 недель.

Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.

Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.

Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов — эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко.

Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env» (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu», «vpr», «vif», «tat», «nef», «rev», «tat».

Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 — антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.

Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.

Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.

Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.

СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии.

  • При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
  • При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается синдром приобретенного иммунодефицита — СПИД.
  • При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.

Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.

CD8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer — убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 — 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.

Тест для определения вич

Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 — 0,8 развивается СПИД.

Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.

#ТестируемсяСами

Ну а теперь о том, ради чего, в числе прочего, написан этот текст. Я понимаю, что, несмотря на рассказы об эпидемии ВИЧ в России, вы уверены, что к вам это не относится. Вас вообще уже проверяли на ВИЧ во время беременности – год, три, пять назад, после чего вы только с мужем, а муж, святой человек, только с вами.

Сейчас появились достаточно достоверные бытовые диагностические тесты для определения ВИЧ. Это полоски похожие на тесты для определения беременности, только вместо мочи нужно нанести на них капельку крови. Продаются в аптеках и стоят относительно недорого, например, я приобрела за 170 рублей. Вы можете проверить себя дома, самостоятельно, в условиях полной анонимности. Ложноположительные результаты практически исключены. Если все делать по инструкции, то в течение 20 минут можно узнать свой ВИЧ статус.

Я купила такой набор и проверила на себе, насколько удобно его использовать.

Из недостатков этого теста хочется отметить следующее.

  • Очень неудобный скарификатор (то, чем нужно проколоть кожу, чтобы появилась капля крови – так в полклинике берут «кровь из пальца»), у меня не получилось его использовать, и у моего партнера тоже, когда он использовал другую российскую тест-систему. Пришлось брать одноразовую иглу от шприца.

  • Нет отдельного контейнера или емкости для биологически опасных отходов, непонятно, как и куда это выбросить. Я сложила все предметы, загрязненные кровью, в отдельный пакет, и утилизировала с бытовыми отходами, что, вообще говоря, не очень хорошо.

Когда тестироваться?

Важно помнить, что антитела к вирусу иммунодефицита появляются в крови самое раннее спустя две недели после заражения, но достоверно статус оцениваю спустя три месяца после контакта с инфицированными жидкостями, хотя в редких случаях появление антител задерживается до полугода.

  • Вирус переносят кровь, компоненты крови, сперма, влагалищный секрет и грудное молоко, попавшие на открытую рану или поврежденные слизистые оболочки.

  • Не содержат вирус слезы, слюна, моча и кал.

Для полной уверенности тестироваться придется дважды: через три месяца от момента возможного инфицирования и через полгода.

Тест для определения вич

Обязательно нужно протестироваться, если вы подозреваете у себя симптомы ВИЧ инфекции. Вопрос это, вообще говоря, не простой, поскольку они крайне неспецифичны и их можно спутать с любым инфекционным заболеванием: слабость, субфебрильная (до 37.5 С) или фебрильная (38 С и выше) температура, лихорадка, различного вида сыпи, безболезненное увеличение всех групп лимфоузлов, диарея…

Если вдруг вы или ваши близкие начинают:

  •  болеть детскими болезнями во взрослом возрасте;

  •  обильно покрываются какой-то сыпью;

  • вдруг открывается неукротимый понос без видимых причин длительностью более 5-7 дней, не поддающийся обычной терапии,

это повод, в том числе, проверить иммунный статус.

Помните, что у вас есть два способа выжить, родить и вырастить здоровых детей: следовать правилу «нет презерватива – нет секса» и стремиться к максимально ранней диагностике заболевания, чтобы вовремя обезопасить своих близких и обратиться за квалифицированной помощью.

7.12.2018

Тест на ВИЧ с применением ПЦР

Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции — полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя — РНК уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы.

Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.

С помощью ПЦР можно разрешить сомнительные результаты, полученные при применении методики иммуноблотинга, диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях (уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения), контролировать эффективность проводимой антиретровирусной терапии, определять стадию заболевания.

Рис. 13. На фото слева нормальный Т-лимфоцит, справа — Т-лимфоцит, инфицируемый ВИЧ. Видны множественные пузыри, между которыми появились новообразованные вирусы (мелкие округлой формы образования). С помощью ПЦР ВИЧ-инфицированность выявляется уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения.

  • С помощью ПЦР возможно выявить сам вирус и его количество.
  • Возможность использования у детей младше полутора лет.
  • Проводить оценку эффективности лечения.
  • Определить тяжесть и прогноз заболевания.
  • Большая стоимость исследования.
  • Наличие специализированных лабораторий.
  • Длительность получения результатов (до 4-х недель).

Кому проводится ПЦР

  1. Получение результата на 7 — 10 день лицам в случае предполагаемого инфицирования, когда желателен результат, полученный в короткие сроки.
  2. Для определения срока начала и оценки эффективности проводимого лечения.
  3. ПЦР проводится инфицированным беременным за 4 недели до родов с целью решения вопроса о применения кесарево сечения.
  4. Новорожденным от инфицированных матерей. Дважды полученный положительный результат свидетельствует о заражении ребенка.
  • РНК ПЦР доказывает факт наличия вируса иммунодефицита в крови и объем выявленной РНК. Данное исследование применяется у диагностированных лиц с целью оценки эффективности проводимой терапии.
  • С помощью ДНК ПЦР определяется наличие вируса в мононуклеарных клетках у детей, когда антитела к вирусу иммунодефицита человека у матери мешает использовать методику ИФА.

Вирусная нагрузка

Вирусная нагрузка определяется путем подсчета количества РНК-копий в 1 мл плазмы крови, что позволяет определить стадию заболевания, провести анализ проводимого специфического лечения, определить тяжесть и прогноз заболевания. Чем выше вирусная нагрузка, тем меньше в плазме крови регистрируется CD4-лимфоцитов.

Интерпретация результатов:

  • РНК либо не выявлена, либо число копий РНК менее 20 в 1 мл. плазмы.
  • РНК выявлена на пределе чувствительности — менее 20 копий/мл.
  • РНК от 20 до 106 копий в 1 мл плазмы крови говорит о достоверности результата.
  • РНК-копий более 106мл — верхний предел линейного диапазона.

быстрые тесты

Увеличение вирусной нагрузки у больного с ВИЧ-инфекцией в три и более раза является клинически значимым результатом.

Контроль над вирусной нагрузкой проводится каждые 3 месяца у больных, лечение которым еще не проводится. В случае начала проведения антиретровирусной терапии контроль осуществляется через 2 — 8 недель.

Рис. 14. ПЦР в последние годы пользуется все большей популярностью.

Рис. 15. Амплификаторы для проведения ПЦР.

Рейтинг
( Пока оценок нет )
Мужской журнал